生物制品的工艺相关 残留和产品相关杂质检测

在产品制造过程中,作为生物过程的一部分,通常会在上游添加许多化学品,以改善产品表达和回收。这些化学物质在下游纯化过程中几乎完全被去除;然而,这些制剂的残留水平可能会保留在原料药和药品中。为了确保这些制剂的水平在安全数量内,需要使用高灵敏度的分析方法来检测和定量这些残留。

除了工艺残留外,与产品相关的杂质也有可能被带入制造和纯化过程。这些杂质,包括宿主细胞蛋白、宿主细胞 DNA、N-端截断和其他潜在修饰,可能会在动物和人类中引起不良反应,因此,必须使用检测来确保存在的任何杂质低于预先确定的可接受水平。

实验室科学家制备下载到高性能液相色谱质谱的样本

网络研讨会 - 生物制药实验室中基于 MS 的杂质调查

查看此网络研讨会,了解可用于通过质谱法鉴定杂质的方法。

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  • 与工艺相关的残留
    残留 方法说明 LOQ (ppm)1 LOD (ppm)1
    IPTG 带有 ELSD/CAD 的 HPLC 6 < 1
    PEI 带有 ELSD/荧光的 HPLC 10/< 2 1-2/< 0.5
    卡那霉素 带有 UV/Vis 的 HPLC 0.03 < 0.01
    消泡剂 带有 ELSD/CAD 的 HPLC 1 0.1
    TFA/醋酸盐 带有 UV/Vis 的 HPLC 1 0.1
    氰酸盐 带有传导性/ECD 的 HPLC 0.6 0.1
    咪唑 带有荧光的 HPLC 0.13 < 0.1
    Triton X-100 带有 ELSD/CAD 的 HPLC 5 1
    聚山梨醇酯(吐温)20/80 带有 ELSD/CAD 的 HPLC 5 1
    两性洗涤剂 带有 ELSD/CAD 的 HPLC 1-5 < 1
    普流尼克 带有 ELSD/CAD 的 HPLC 1-5 < 1
    蛋白 A ELISA 0.001-0.10 < 0.001
    PEG 带有 ELSD/CAD 的 HPLC 1-10 < 0.5
    TRIS HPLC 1-10 < 0.5
    生长因子(例如胰岛素、干扰素) ELISA 0.001-0.10 < 0.001
  • 产品相关杂质
    杂质 方法说明 LOQ (ppm) LOD (ppm)
    宿主细胞蛋白 (HCP) 商业试剂盒或定制化验 0.001-0.010 < 0.001
    N-端截断 N-端测序 > 10%  
    宿主细胞 DNA PCR 方法和产品相关
    氧化/脱酰胺 (PTM) 肽图分析 LC-MS 或 LC-MS/MS、IsoQuant HPLC 方法和产品相关
    异构体分析 离子交换 HPLC、cIEF、唾液酸分析 方法和产品相关
    二硫键加扰(错误折叠);构象杂质 肽图分析 LC-MS 或 LC-MS/MS、Ellman 游离巯基、内在色氨酸荧光、ANS 染料结合、NMR 方法和产品相关
    C-端完整性 肽图分析 LC-MS 或 LC-MS/MS 方法和产品相关
    聚合 分析超速离心 (AUC)、SEC/SEC-MALLS、动态光散射 (DLS) 方法和产品相关